“邊緣效應(yīng)”是指在利用96孔板進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，細(xì)胞在孔板中的位置會(huì)影響細(xì)胞的生長狀態(tài)，尤其是處在周邊及四個(gè)角的孔中細(xì)胞通常會(huì)表現(xiàn)出分布不均的現(xiàn)象。
出現(xiàn)“邊緣效應(yīng)”的原因主要有兩方面：
1. 溫度效應(yīng)：經(jīng)研究證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度可能是根本原因。孔板的聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。
2. 蒸發(fā)效應(yīng)：雖然通常細(xì)胞培養(yǎng)箱中都會(huì)放置一盤雙蒸水以維持培養(yǎng)箱中的濕度，但仍難達(dá)到多孔板中的濕度，特別是在培養(yǎng)箱經(jīng)常開關(guān)的情況更是如此。由于位置效應(yīng)，邊緣孔的濕度較中間孔更低，水分揮發(fā)的現(xiàn)象就更為嚴(yán)重。這樣就容易造成四周培養(yǎng)基的體積會(huì)明顯少于中間孔，而四個(gè)角落的孔尤為嚴(yán)重。
所以我們在鋪96孔板的時(shí)候，一般外圍這一圈是加PBS，中間的60個(gè)孔才加細(xì)胞。
細(xì)節(jié)決定成敗，細(xì)胞鋪板看似簡單，實(shí)則需要耐心、細(xì)致的操作。當(dāng)然，熟能生巧，相信你多鋪幾塊板，自己也能總結(jié)出自己的經(jīng)驗(yàn)。
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